Создание штамма – продуцента бактериальной пуриннуклеозидфосфорилазы, слитой с человеческим аннексином А5
https://doi.org/10.29235/1029-8940-2020-65-2-239-244
Анатацыя
Бактериальная пуриннуклеозидфосфорилаза (ПНФаза), в отличие от ПНФазы млекопитающих, способна подвергать фосфоролитическому расщеплению аденозин и его производные с образованием свободных азотистых оснований. Это позволяет использовать ПНФазу бактерий (при условии решения проблемы доставки этого фермента или его гена в клетки-мишени) в качестве пролекарственной терапии рака. Кроме того, ПНФаза в ложе опухоли может разрушать внеклеточный аденозин, который, как известно, защищает раковые клетки от противоопухолевого иммунитета.
В результате проведенного исследования сконструирован новый штамм Escherichia coli, продуцирующий химерный белок, молекула которого состоит из гомологичной ПНФазы, слитой с человеческим аннексином А5 – белком, проявляющим сродство к раковым клеткам. Продуцирующая способность штамма – продуцента химерного белка «Аннексин-ПНФаза» в отношении ПНФазы, рассчитанная по результатам реакции фосфоролиза инозина, составила 10 200 ед/мл культуральной жидкости. Полученный штамм предназначен для создания технологии получения новых противоопухолевых препаратов.
Аб аўтарах
А. Булатовский
Институт микробиологии НАН Беларуси
Беларусь
Беларусь
А. Зинченко
Институт микробиологии НАН Беларуси
Беларусь
Беларусь
Спіс літаратуры
1. Expression, purification, and characterization of recombinant purine nucleoside phosphorylase from Escherichia coli / J. Lee [et al.] // Protein Expr. Purif. – 2001. – Vol. 22, N 2. – Р. 180–188. https://doi.org/10.1006/prep.2001.1437
2. Portsmouth, D. Suicide genes for cancer therapy / D. Portsmouth, J. Hlavaty, M. Renner // Mol. Aspects Med. – 2007. – Vol. 28, N 1. – P. 4–41. https://doi.org/10.1016/j.mam.2006.12.001
3. Krais, J. J. Purine nucleoside phosphorylase targeted bу Annexin V to breast cancer vasculature for enzyme prodrug therapy / J. J. Krais, О. De Crescenzo, R. G. Harrison // PLoS ONE. – 2013. – Vol. 8, N 10. – P. е76403. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076403
4. In vivo gene therapy of cancer with Е. coli purine nucleoside phosphorylase / W. В. Parker [et аl.] // Hum. Gene Ther. – 1997. – Vol. 8, N 14. – Р. 1637–1644. https://doi.org/10.1089/hum.1997.8.14-1637
5. Синтез флударабин-5′-монофосфата с использованием бактериальных рекомбинантных ферментов / А. И. Береснев [и др.] // Вес. Нац. акад. навук Беларусі. Сер. бiял. навук. – 2017. – Т. 62, № 1. – С. 7–15.
6. In search of a novel target – phosphatidylserine exposed by non-apoptotic tumor cells and metastases of malignancies with poor treatment efficacy / S. Riedl [et al.] // Biochim. Biophys. Acta. Biomembranes. – 2011. – Vol. 1808, N 11. – P. 2638– 2645. https://doi.org/10.1016/j.bbamem.2011.07.026
7. Sharma, B. Phosphatidylserine: a cancer cell targeting biomarker / B. Sharma, S. S. Kanwar // Semin. Cancer Biol. – 2018. – Vol. 52, Pt. 1. – P. 17–25. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2017.08.012
8. Sambrook, J. F. Molecular cloning: a laboratory manual / J. F. Sambrook, D. W. Russell. – 3rd ed. – New York : Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001. – 2100 p.
9. Quan, J. Circular polymerase extension cloning of complex gene libraries and pathways / J. Quan, J. Tian // PLoS ONE. – 2009. – Vol. 4, N 7. – P. e6441. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0006441
10. Walker, J. M. The protein protocol handbook / J. M. Walker. – 2nd ed. – Totowa : Humana Press, 2002. – 15 p.
11. Vaupel, P. Hypoxia-driven adenosine accumulation: a crucial microenvironmental factor promoting tumor progression / P. Vaupel, A. Mayer // Advances in Experimental Medicine and Biology / ed. : C. E. Elwell, T. S. Leung, D. K. Harrison. – New York, 2016. – Vol. 876 : Oxygen Transport to Tissue. – P. 177–183.
12. Зинченко, А. И. Аденозин как потенциальная мишень для биотерапии рака / А. И. Зинченко // Вес. Нац. акад. навук Беларусi. Сер. бiял. навук. – 2016. – Т. 61, № 4. – С. 118–128.
##reviewer.review.form##
Праглядаў: 537
Паслаць артыкул па эл. пошце 
