vestibИзвестия Национальной академии наук Беларуси. Серия биологических наукProceedings of the National Academy of Sciences of Belarus, Biological Series1029-89402524-230XThe Republican Unitary Enterprise Publishing House "Belaruskaya Navuka"vestib-18Research ArticleК 85-ЛЕТИЮ НАЦИОНАЛЬНОЙ АКАДЕМИИ НАУК БЕЛАРУСИANNIVERSARY OF THE FOUNDATION OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF BELARUSОднореакторный ферментативный синтез дезоксинуклеозидтрифосфатовOne-pot enzymatic synthesis of deoxynucleoside trihosphatesРымкоА. Н.RymkoA. N.noemail@neicon.ruКвачС. В.KvachS. V.noemail@neicon.ruЗинченкоА. И.ZinchenkoA. I.zinch@mbio.bas-net.byИнститут микробиологии НАН БеларусиBelarus20140706201601101105Copyright © Рымко А.Н., Квач С.В., Зинченко А.И., 20162016Рымко А.Н., Квач С.В., Зинченко А.И.Rymko A.N., Kvach S.V., Zinchenko A.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vestibio.belnauka.by/jour/article/view/18

С помощью методов генной инженерии созданы штаммы E. coli - продуценты рекомбинантных дезоксину-клеозидкиназы Drosophila melanogaster, дезоксинуклеозидмонофосфаткиназы бактериофага Т5, гомологичных нуклеозиддифосфаткиназы и ацетаткиназы, содержащих на С-конце молекул полигистидиновый олиго-пептид. С использование выделенных рекомбинантных ферментов проведен препаративный синтез четырех канонических дезоксинуклеозидтрифосфатов, выход реакции составлял 95-97 %. Время достижения максимального выхода реакции - около 4 ч.

Using methods of genetic engineering strains E. coli producing deoxynucleoside kinase of D. melanogaster, deoxynucle-oside monophosphate kinase of bacteriophage T5, homologous nucleoside-diphosphate kinase and acetate kinase, with additional С-terminal fusion polyhistidine oligopeptide were constructed. Four canonical deoxynucleoside triphosphates were synthesized using the recombinant enzymes. The yields of the reactions were 95-97 %. The conversion was completed within 4 h.

ReferencesChambers R., Khorana H. // J. Am. Chem. Soc. 1957. Vol. 79, N 14. P. 3752-3756.Chambers R., Khorana H. // J. Am. Chem. Soc. 1957. Vol. 79, N 14. P. 3752-3756.Hoffmann C., Genieser H. G., Veron M, Jastorff B. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996. Vol. 6, N 21. P. 2571-2574.Hoffmann C., Genieser H. G., Veron M, Jastorff B. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996. Vol. 6, N 21. P. 2571-2574.Borsenberger V., Kukwikila M., Howorka S. // Org. Biomol. Chem. 2009. Vol. 7, N 18. P. 3826-3835.Borsenberger V., Kukwikila M., Howorka S. // Org. Biomol. Chem. 2009. Vol. 7, N 18. P. 3826-3835.Caton-Williams J., Smith M., Carrasco N., Huang Z. // Organic Lett. 2011. Vol. 13, N 16. P. 4156-4159.Caton-Williams J., Smith M., Carrasco N., Huang Z. // Organic Lett. 2011. Vol. 13, N 16. P. 4156-4159.Johansson M., Van Rompay A. R., Degreve B. et al. // J. Biol. Chem. 1999. Vol. 274, N 34. P. 23814-23819.Johansson M., Van Rompay A. R., Degreve B. et al. // J. Biol. Chem. 1999. Vol. 274, N 34. P. 23814-23819.Knecht W., Munch-Petersen B., Piskur J. // J. Mol. Biol. 2000. Vol. 301, N 4. P. 827-837.Knecht W., Munch-Petersen B., Piskur J. // J. Mol. Biol. 2000. Vol. 301, N 4. P. 827-837.Bessman M. J, Herriott S. T., van Bibber Orr M. J. // J. Biol. Chem. 1965, N 1. Vol. 240. P. 439-445.Bessman M. J, Herriott S. T., van Bibber Orr M. J. // J. Biol. Chem. 1965, N 1. Vol. 240. P. 439-445.Скоблов А. Ю., Микулинская Г. В., Таран С. А. и др. // Биоорган. химия. 2009. Т. 34, № 6. С. 816-821.Скоблов А. Ю., Микулинская Г. В., Таран С. А. и др. // Биоорган. химия. 2009. Т. 34, № 6. С. 816-821.Bello L. J., Bessman M. J. // Biochim. Biophys. Acta. 1963. Vol. 72. P. 647-650.Bello L. J., Bessman M. J. // Biochim. Biophys. Acta. 1963. Vol. 72. P. 647-650.Kakuda H., Hosono K., Shiroishi K., Ichihara S. // J. Biochem. 1994. Vol. 116. P. 916-922.Kakuda H., Hosono K., Shiroishi K., Ichihara S. // J. Biochem. 1994. Vol. 116. P. 916-922.Sambrook J., Mac Callum P., Russell D. // Molecular cloning: a laboratory manual. N. Y., 2000.Sambrook J., Mac Callum P., Russell D. // Molecular cloning: a laboratory manual. N. Y., 2000.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.