vestibИзвестия Национальной академии наук Беларуси. Серия биологических наукProceedings of the National Academy of Sciences of Belarus, Biological Series1029-89402524-230XThe Republican Unitary Enterprise Publishing House "Belaruskaya Navuka"vestib-149Research ArticleСтатьиЭффективность мультиплексной RT-PCR для дифференциальной диагностики вирусов голубики высокорослой (Vaccinium corymbosum L.)Efficiency of multiplex RT-PCR for differential detection of blueberry (Vaccinium corymbosum L.) virusesБожидайТ. Н.BazhydaiT. N.tanya_bozhidaj@maU.ruВолосевичН. Н.ValasevichN. N.noemail@neicon.ruКухарчикН. В.KukharchikN. V.noemail@neicon.ruИнститут плодоводстваBelarus201507062016038084Copyright © Божидай Т.Н., Волосевич Н.Н., Кухарчик Н.В., 20162016Божидай Т.Н., Волосевич Н.Н., Кухарчик Н.В.Bazhydai T.N., Valasevich N.N., Kukharchik N.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vestibio.belnauka.by/jour/article/view/149

Разработка мультиплексной RT-PCR (mRT-PCR) для одновременного выявления нескольких вирусов голубики является актуальной задачей, направленной на своевременную дифференциальную диагностику вирусов с целью оптимизации и удешевления мероприятий по контролю над распространением данных патогенов. В результате проведенных исследований установлено, что метод mRT-PCR с использованием двух комбинаций праймеров (ШШ, MF05-22-F/MF05-21-R, AtropaNad2.1a/2.2b и RDP-1/RDP-2, MF05-22-F/MF05-21-R, AtropaNad2.1a/2.2b) может быть применен для одновременной и дифференциальной диагностики таких патогенов голубики, как вирус ожога голубики (В^еУ) и вирус кольцевой пятнистости табака (TRSV). Использование mRT-PCR для выявления вирусных патогенов голубики позволяет, в сравнении с RT-PCR, снизить затраты на проведение тестирования на 49,5 %.

It was found that multiplex RT-PCR (mRT-PCR) method with two combinations of primers (1F/1R, MF05-22-F/MF05-21-R, AtropaNad2.1a/2.2b and RDP-1/RDP-2, MF05-22-F/MF05-21-R, AtropaNad2.1a/2.2b) can be used for the simultaneous and differential detection of blueberry pathogens (Blueberry scorch carlavirus, Tobacco ringspot nepovirus). Application of mRT-PCR for detection of virus diseases of blueberry plants allows to reduce testing costs on 49.5 % in comparison with simplex RT-PCR.

ReferencesCertification schemes. Pathogen-tested material of Vaccinium spp. EPPO Standards PM 4/18 (1) // Bull. OEPP/EPPO. 1997. Vol. 27. P. 195-204.Certification schemes. Pathogen-tested material of Vaccinium spp. EPPO Standards PM 4/18 (1) // Bull. OEPP/EPPO. 1997. Vol. 27. P. 195-204.Menzel W., Zahn V., Maiss E. // J. of Virol. Meth. 2003. Vol. 110. P. 153-157.Menzel W., Zahn V., Maiss E. // J. of Virol. Meth. 2003. Vol. 110. P. 153-157.Hassan M., Myrta A., Polak J. // J. of Virol. Meth. 2006. Vol. 133. P. 124-129.Hassan M., Myrta A., Polak J. // J. of Virol. Meth. 2006. Vol. 133. P. 124-129.Yu Y., Zhao Z., Jiang D. et al. // Lett. in Appl. Microbiol. 2013. Vol. 57. P. 350-355.Yu Y., Zhao Z., Jiang D. et al. // Lett. in Appl. Microbiol. 2013. Vol. 57. P. 350-355.Menzel W., Jelkmann W., Maiss E. // J. of Virol. Meth. 2002. Vol. 99. P. 81-92.Menzel W., Jelkmann W., Maiss E. // J. of Virol. Meth. 2002. Vol. 99. P. 81-92.Thompson J. R, Wetzel S, Klerks M. M. et al. // J. of Virol. Meth. 2003. Vol. 111. P. 85-93.Thompson J. R, Wetzel S, Klerks M. M. et al. // J. of Virol. Meth. 2003. Vol. 111. P. 85-93.Ji Z., Zhao X., Duan H. et al. // Acta Virol. 2013. Vol. 57. P. 435-441.Ji Z., Zhao X., Duan H. et al. // Acta Virol. 2013. Vol. 57. P. 435-441.Yao B., Wang G., Ma X. et al. // J. of Virol. Meth. 2014. Vol. 196. P. 113-119.Yao B., Wang G., Ma X. et al. // J. of Virol. Meth. 2014. Vol. 196. P. 113-119.Noorani M. S., Awasthi P., Sharma M. P. et al. // J. of Virol. Meth. 2013. Vol. 193. P. 103-107.Noorani M. S., Awasthi P., Sharma M. P. et al. // J. of Virol. Meth. 2013. Vol. 193. P. 103-107.Jarosova J., Kundu J. K. // Scientia Horticulturae. 2010. Vol. 125. P. 68-72.Jarosova J., Kundu J. K. // Scientia Horticulturae. 2010. Vol. 125. P. 68-72.Liu F., Feng L., Chen X. et al. // J. of Phytopathol. 2012. Vol. 160. P. 622-627.Liu F., Feng L., Chen X. et al. // J. of Phytopathol. 2012. Vol. 160. P. 622-627.Bertolini E., Olmos A., Martinez M. C. et al. // J. of Virol. Meth. 2001. Vol. 96. P. 33-41.Bertolini E., Olmos A., Martinez M. C. et al. // J. of Virol. Meth. 2001. Vol. 96. P. 33-41.Ali R. N., Dann A. L., Cross P. A., Wilson C. R. // Arch. of Virol. 2014. Vol. 159. P. 3095-3099.Ali R. N., Dann A. L., Cross P. A., Wilson C. R. // Arch. of Virol. 2014. Vol. 159. P. 3095-3099.Tuo D., Shen W., Yang Y. et al. // Viruses. 2014. Vol. 6. P. 3893-3906.Tuo D., Shen W., Yang Y. et al. // Viruses. 2014. Vol. 6. P. 3893-3906.Wegener L. A. // Epidemiology and strain identification of blueberry scorch virus on highbush blueberry in British Columbia: thesis.. master of science in plant virology. Burnaby, 2006.Wegener L. A. // Epidemiology and strain identification of blueberry scorch virus on highbush blueberry in British Columbia: thesis.. master of science in plant virology. Burnaby, 2006.Paduch-Cichal E., Chodorska M., Kalinowska E., Komorowska B. // Acta Sci. Pol., Hortorum Cultus. 2014. Vol. 13, N 3. P. 3-11.Paduch-Cichal E., Chodorska M., Kalinowska E., Komorowska B. // Acta Sci. Pol., Hortorum Cultus. 2014. Vol. 13, N 3. P. 3-11.Fuchs M., Abawi G. S., Marsella-Herrick P. et al. // J. of Plant Pathol. 2010. Vol. 92, N 2. P. 451-459.Fuchs M., Abawi G. S., Marsella-Herrick P. et al. // J. of Plant Pathol. 2010. Vol. 92, N 2. P. 451-459.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.