vestibИзвестия Национальной академии наук Беларуси. Серия биологических наукProceedings of the National Academy of Sciences of Belarus, Biological Series1029-89402524-230XThe Republican Unitary Enterprise Publishing House "Belaruskaya Navuka"vestib-123Research ArticleСтатьиМолекулярно-генетический и функциональный анализ cry-генов природных изолятов бактерий Bacillus thuringiensisMolecular genetic and functional analysis of cry-genes from native strains of Bacillus thuringiensisАнаньеваИ. Н.AnanyevaI. N.noemail@neicon.ruРубельИ. Э.RubelI. E.noemail@neicon.ruВалентовичЛ. Н.ValentovichL. N.noemail@neicon.ruКоломиецЭ. И.KolomietsE. I.noemail@neicon.ruТитокМ. А.TitokM. A.titok@bsu.byИнститут микробиологии НАН БеларусиBelarus201507062016025055Copyright © Ананьева И.Н., Рубель И.Э., Валентович Л.Н., Коломиец Э.И., Титок М.А., 20162016Ананьева И.Н., Рубель И.Э., Валентович Л.Н., Коломиец Э.И., Титок М.А.Ananyeva I.N., Rubel I.E., Valentovich L.N., Kolomiets E.I., Titok M.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vestibio.belnauka.by/jour/article/view/123

В результате проведенного исследования идентифицированы cry1-детерминанты природных бактерий штаммов Bacillus thuringiensis БИМ В-787 Д и БИМ В-335 Д, продуцирующие токсины Cry1E и Cry1A. Ген cry1E с промоторной и терминаторной последовательностью был амплифици-рован и клонирован в плазмидном векторе, который не способен передаваться путем конъюгации в клетки других микроорганизмов и имеет узкий круг бактериальных хозяев. Показана инсектицидная активность бактерий B. subtilis 168, содержащих плазмиду с геном cry1E, транскрипция которого обеспечена двумя независимыми промоторными последовательностями.

The study identified cry1-determinants of natural bacteria Bacillus thuringiensis strains BIM B-787 A and BIM B-335 D, producing Cry1E and Cry1A toxins. cry1E gene with promoter and terminator sequence was amplified and cloned into a plas-mid vector that is not able to be transferred by conjugation into the cells of other organisms, and has a narrow range of bacterial hosts. Shows the insecticidal activity of bacteria B. subtilis 168 containing the plasmid with the cry1E gene, transcription of which was provided by two independent promoter sequences.

ReferencesBullock W. O., Fernandez J. M., Short J. M. // BioTechniques. 1987. Vol. 5. P. 376-378.Bullock W. O., Fernandez J. M., Short J. M. // BioTechniques. 1987. Vol. 5. P. 376-378.Anagnostopoulos C., Spizizen J. // J. Bacteriol. 1961. Vol. 81, N 5. P. 741-746.Anagnostopoulos C., Spizizen J. // J. Bacteriol. 1961. Vol. 81, N 5. P. 741-746.Челночный вектор для молекулярного клонирования в бактериях Bacillus subtilis и Escherichia coli (варианты) и способ его конструирования: а. с. 7537 МПК, C12N15/63 / А. В. Лагодич, М. А. Титок; Белорус. гос. ун-т. - № А20030886. Минск, 2003. С. 1-6.Челночный вектор для молекулярного клонирования в бактериях Bacillus subtilis и Escherichia coli (варианты) и способ его конструирования: а. с. 7537 МПК, C12N15/63 / А. В. Лагодич, М. А. Титок; Белорус. гос. ун-т. - № А20030886. Минск, 2003. С. 1-6.Vagner V., Dervyn E., Ehrlich S. D. // Microbiol. Read Engl. 1998. Vol. 144 (Pt 11). P. 3097-3104.Vagner V., Dervyn E., Ehrlich S. D. // Microbiol. Read Engl. 1998. Vol. 144 (Pt 11). P. 3097-3104.Sambrook J., Russell D. W. Molecular Cloning: а Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001. - 756 p.Sambrook J., Russell D. W. Molecular Cloning: а Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001. - 756 p.Te Riele H., Michel B., Ehrlich S. D. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. Vol. 83, N 8. P. 2541-2545.Te Riele H., Michel B., Ehrlich S. D. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. Vol. 83, N 8. P. 2541-2545.Reyes-Ramirez A., Ibarra J. E. // Appl. Environ. Microbiol. 2005. Vol. 71, N 3. P. 1346-1355.Reyes-Ramirez A., Ibarra J. E. // Appl. Environ. Microbiol. 2005. Vol. 71, N 3. P. 1346-1355.Ceron J., Oriz A., Quintero R. et al. // Appl. Environ. Microbiol. 1995. Vol. 61, N 11. P. 3826-3831.Ceron J., Oriz A., Quintero R. et al. // Appl. Environ. Microbiol. 1995. Vol. 61, N 11. P. 3826-3831.Ben-Dov E., Zaritsky A., Dahan E. et al. // Appl. Environ. Microbiol. 1997. Vol. 63, N 12. P. 4883-4890.Ben-Dov E., Zaritsky A., Dahan E. et al. // Appl. Environ. Microbiol. 1997. Vol. 63, N 12. P. 4883-4890.BLAST: Basic Local Alignment Search Tool [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http:// blast.ncbi.nlm.nih.gov/ Blast. cgi. - Дата доступа: 18.12.2014.BLAST: Basic Local Alignment Search Tool [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http:// blast.ncbi.nlm.nih.gov/ Blast. cgi. - Дата доступа: 18.12.2014.Reyes-Ramwz A., Ibarra J. E. // Appl. Environ. Microbiol. 2008. Vol. 74, N 1. P. 125-129.Reyes-Ramwz A., Ibarra J. E. // Appl. Environ. Microbiol. 2008. Vol. 74, N 1. P. 125-129.Liu X., Ruan L., Peng D. et al. // Toxins. 2014. Vol. 6, N 8. P. 2229-2238.Liu X., Ruan L., Peng D. et al. // Toxins. 2014. Vol. 6, N 8. P. 2229-2238.Bravo A., Gomez I., Porta H. et al. // Microb. Biotechnol. 2013. Vol. 6, N 1. P. 17-26.Bravo A., Gomez I., Porta H. et al. // Microb. Biotechnol. 2013. Vol. 6, N 1. P. 17-26.Yang H., Wang P., Peng Q. et al. // Appl. Environ. Microbiol. 2012. Vol. 78, N 18. P. 6466-6474.Yang H., Wang P., Peng Q. et al. // Appl. Environ. Microbiol. 2012. Vol. 78, N 18. P. 6466-6474.Crissman J. W., Causey S. C., Thorne L. et al. // Appl. Environ. Microbiol. 1989. Vol. 55, N 9. P. 2302-2307.Crissman J. W., Causey S. C., Thorne L. et al. // Appl. Environ. Microbiol. 1989. Vol. 55, N 9. P. 2302-2307.Theoduloz C., Vega A., Salazar M. et al. // J. Appl. Microbiol. 2003. Vol. 94, N 3. P. 375-381.Theoduloz C., Vega A., Salazar M. et al. // J. Appl. Microbiol. 2003. Vol. 94, N 3. P. 375-381.Yansura D. G., Henner D. J. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984. Vol. 81, N 2. P. 439-443.Yansura D. G., Henner D. J. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984. Vol. 81, N 2. P. 439-443.Hu X., Hansen B. M., Eilenberg J. et al. // FEMS Microbiol Lett. 2004. Vol. 231, N 1. P. 45-52.Hu X., Hansen B. M., Eilenberg J. et al. // FEMS Microbiol Lett. 2004. Vol. 231, N 1. P. 45-52.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.